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培養皿使用全指南:從滅菌到使用的關鍵步驟解析
以下是天津本生對培養皿從滅菌到使用的全流程關鍵步驟解析,綜合實驗室規范與操作要點:
一、滅菌前處理
新培養皿預處理?
熱水沖洗后浸泡1-2%鹽酸溶液6小時,去除游離堿性物質
蒸餾水沖洗15次以上,確保無酸殘留
重復使用培養皿?
立即浸泡防干涸,軟毛刷+中性洗滌劑清潔死角
玻璃培養皿需酸浸過夜,塑料培養皿建議一次性使用
二、滅菌方法選擇
滅菌方式 參數要求 適用場景
高壓蒸汽? 121℃、30分鐘 細菌培養/常規滅菌
干熱滅菌? 160℃、2小時 玻璃器皿滅菌
紫外線? 照射≥30分鐘 表面消毒/應急處理
注:滅菌后需倒置存放,防止冷凝水污染
三、無菌操作規范
培養基灌注?
瓊脂培養基冷卻至45-50℃傾注,厚度3-4mm
液體培養基覆蓋皿底1-2mm,避免氣泡產生
接種技術要點?
劃線法?:分區劃線,每區灼燒接種環
涂布法?:L型玻棒均勻涂布,菌液量≤0.1ml
倒置培養?:防止冷凝水滴落沖散菌落
四、使用后處理
污染防控?
生物危害樣本需121℃高壓滅菌后再清洗
不同實驗區域分色標記(如紅色-細菌/藍色-細胞)
存儲條件?
未開封培養皿:避光防潮,溫度≤25℃
滅菌后培養皿:密封保存,建議1周內使用
五、常見問題解決
培養基干裂?:培養箱內放置水盤保持濕度>60%
菌落蔓延?:控制接種量,劃線分區不重疊
污染判斷?:異常渾濁/異味需立即終止實驗
注:所有操作需佩戴無粉手套,實驗臺每日紫外消毒30分鐘,以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師。
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